Galvenā atšķirība - plūsmas citometrija un FACS

Šūnu teorijas kontekstā šūnas ir visu dzīvo organismu strukturālā un funkcionālā pamatvienība. Šūnu šķirošana ir metodika, kas tiek izmantota, lai atdalītu dažādas šūnas atbilstoši fizioloģiskajām un morfoloģiskajām īpašībām. Viņiem var būt intracelulāras vai ārpusšūnu pazīmes. DNS, RNS un olbaltumvielu mijiedarbība tiek uzskatīta par starpšūnu interaktīvām īpašībām, savukārt forma, lielums un dažādas virsmas olbaltumvielas tiek uzskatītas par ārpusšūnu īpašībām. Mūsdienu zinātnē šūnu šķirošanas metodoloģijas ir palīdzējušas veikt dažādus pētījumus bioloģiskos pētījumos, kā arī jaunu principu noteikšanā, izmantojot medicīnas pētījumus. Šūnu šķirošana tiek veikta pēc dažādām metodikām, kas ietver gan primitīvas ar mazāku aprīkojumu, gan progresīvas tehnoloģiskās metodoloģijas, izmantojot sarežģītas iekārtas. Plūsmas citometrija, fluorescējoši aktivētu šūnu šķirošana (FACS), magnētisko šūnu atlase un vienšūnu šķirošana ir galvenās izmantotās metodoloģijas. Plūsmas citometrija un FACS ir izstrādāta, lai diferencētu šūnas pēc to optiskajām īpašībām. FACS ir specializēts plūsmas citometrijas veids. Plūsmas citometrija ir metodika, kuru izmanto heterogēno šūnu populācijas analīzē pēc dažādām šūnu virsmas molekulām, lieluma un apjoma, kas ļauj izpētīt atsevišķas šūnas. FACS ir process, kurā šūnu paraugu maisījumu sadala divās vai vairākās tvertnēs pēc to gaismas izkliedes un fluorescences īpašībām. Šī ir galvenā atšķirība starp plūsmas citometriju un FACS.

SATURS

1. Pārskats un galvenās atšķirības 2. Kas ir plūsmas citometrija 3. Kas ir FACS 4. Līdzības starp plūsmas citometriju un FACS 5. Salīdzinājums blakus - plūsmas citometrija un FACS tabulas formā 6. Kopsavilkums

Kas ir plūsmas citometrija?

Plūsmas citometrija ir metode, ko izmanto, lai pārbaudītu un noteiktu intracelulāro molekulu un šūnu virsmas ekspresiju un noteiktu un raksturotu atšķirīgus šūnu tipus. To izmanto arī, lai noteiktu šūnu tilpumu un šūnu lielumu un novērtētu izolēto apakšpopulāciju tīrību. Tas ļauj vairāku šūnu parametru novērtējumu veikt vienlaicīgi. Plūsmas citometriju izmanto, lai izmērītu fluorescences intensitāti, kas rodas ar fluorescējoši iezīmētu antivielu palīdzību, kas palīdz identificēt olbaltumvielas vai ligandas, kas saistās ar saistītajām šūnām.

Parasti plūsmas citometrija ietver galvenokārt trīs apakšsistēmas. Tie ir šķidrumi, elektronika un optika. Plūsmas citometrijā ir pieejami pieci galvenie komponenti, kurus izmanto šūnu šķirošanā. Tie ir plūsmas elementi (šķidruma plūsma, ko izmanto, lai tos transportētu un izlīdzinātu elementus optiskās noteikšanas procesam), mērīšanas sistēma (var būt dažādas sistēmas, ieskaitot dzīvsudraba un ksenona lampas, lieljaudas ūdens dzesēšanu vai mazjaudas ar gaisu dzesējamiem lāzeriem vai diožu lāzeriem), ADC; Analogā digitālā pārveidotāja sistēma, pastiprināšanas sistēma un dators analīzei. Iegūšana ir process, kurā datus savāc no paraugiem, izmantojot plūsmas citometru. Šo procesu nodrošina dators, kas savienots ar plūsmas citometru. Datorā esošā programmatūra analizē informāciju, kas no plūsmas citometra tiek piegādāta datoram. Programmatūrai ir arī iespēja pielāgot plūsmas citometru kontrolējošā eksperimenta parametrus.

Kas ir FACS?

Plūsmas citometrijas kontekstā fluorescences aktivizēta šūnu šķirošana (FACS) ir metode, ko izmanto, lai atšķirtu un šķiro bioloģisko šūnu maisījuma paraugu. Šūnas tiek atdalītas no diviem vai vairākiem traukiem. Kārtošanas metodes pamatā ir šūnas fizikālās īpašības, kas ietver šūnas gaismas izkliedes un fluorescences īpašības. Šī ir svarīga zinātniska tehnika, kuru var izmantot, lai iegūtu ticamus kvantitatīvos un kvalitatīvos rezultātus no katras šūnas izstarotajiem fluorescences signāliem. FACS laikā sākotnēji iepriekš iegūtais šūnu maisījums; suspensija tiek virzīta uz šauras šķidruma plūsmas centru, kas ātri izplūst. Šķidruma plūsma tiek veidota tā, lai suspensijas šūnas atdalītu, pamatojoties uz katras šūnas diametru. Suspensijas plūsmai tiek piemērots vibrācijas mehānisms, kā rezultātā veidojas atsevišķas pilītes.

Sistēma ir kalibrēta, lai izveidotu vienu pilienu ar vienu šūnu. Tieši pirms pilienu veidošanās plūsmas suspensija pārvietojas pa fluorescences mērīšanas ierīci, kas nosaka katras šūnas fluorescences raksturlielumus. Pilienu veidošanās vietā tiek uzlikts elektriskais lādēšanas gredzens, kas pirms fluorescences intensitātes mērīšanas gredzenam tiek uzlādēts. Kad pilieni ir izveidoti no suspensijas plūsmas, pilienos tiek ieslodzīts lādiņš, kas pēc tam nonāk elektrostatiskās novirzes sistēmā. Saskaņā ar lādiņu sistēma pilienus novirza dažādos traukos. Maksas piemērošanas metode mainās atkarībā no dažādām FACS izmantotajām sistēmām. FACS izmantotais aprīkojums ir pazīstams kā ar fluorescenci aktivēts šūnu šķirotājs.

Kāda ir plūsmas citometrijas un FACS līdzība?


  • Plūsmas citometrija un FACS ir izstrādāta, lai diferencētu šūnas pēc to optiskajām īpašībām.

Kāda ir atšķirība starp plūsmas citometriju un FACS?

Kopsavilkums - plūsmas citometrija vs FACS

Šūna ir visu dzīvo organismu galvenā strukturālā un funkcionālā vienība. Šūnu šķirošana ir process, kurā šūnas tiek izolētas un diferencētas dažādās kategorijās, pamatojoties uz to starpšūnu un ārpusšūnu īpašībām. Plūsmas citometrija un FACS ir divas svarīgas šūnu šķirošanas metodikas. Abi procesi ir izstrādāti, lai diferencētu šūnas pēc to optiskajām īpašībām. Plūsmas citometrija ir metodika, kuru izmanto heterogēno šūnu populācijas analīzē pēc dažādām šūnu virsmas molekulām, lieluma un apjoma, kas ļauj izpētīt atsevišķas šūnas. FACS ir process, kurā šūnu paraugu maisījumu sadala divās vai vairākās tvertnēs pēc to gaismas izkliedes un fluorescences īpašībām. Šī ir atšķirība starp plūsmas citometriju un FACS.

Lejupielādējiet plūsmas citometrijas un FACS PDF versiju

Varat lejupielādēt šī raksta PDF versiju un izmantot to bezsaistes vajadzībām, kā norādīts citēšanas piezīmē. Lūdzu, lejupielādējiet šeit PDF versiju. Starpība starp plūsmas citometriju un FACS

Atsauce:

  1. Plūsmas citometrija (FCM) / FACS | Fluorescences aktivizēta šūnu šķirošana (FACS). Pieejams 2017. gada 22. septembrī. Pieejams šeit: Ibrahim, Sherrif F. un Ger van den Engh. “Plūsmas citometrija un šūnu šķirošana.” SpringerLink, Springer, Berlīne, Heidelberga, 1970. gada 1. janvāris. Pieejams 2017. gada 22. septembrī. Pieejams šeit

Attēla pieklājība:


  1. 'Citometrs'By Kierano - paša darbs, (CC BY 3.0), izmantojot Commons Wikimedia' Fluorescence Assisted Cell Sorting (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) In vitro modeļa sistēmas izstrāde Equus caballus mijiedarbības izpētei IgE ar augstas afinitātes FcεRI receptoru (doktora disertācija), Šefīldas Universitāte, (CC BY-SA 3.0), izmantojot Commons Wikimedia